天葵化学成分的研究Ⅰ.天葵苷的结构
作者：刘延泽 王荩卿 谢 兰 贺存恒 谢晶曦**
单位：刘延泽 河南中医学院植化教研室(郑州450003)；王荩卿 广西壮族自治区桂林地区教师进修学院；谢 兰 贺存恒 谢晶曦**中国医学科学院药物研究所，中国协和医科大学
关键词：天葵;黄酮碳苷;天葵苷
天葵化学成分的研究 摘 要 从毛茛科植物天葵Semiaquilegia adoxoides(DC.) Mak.干燥全草中分得一种黄酮双糖苷称天葵苷(semiaquilinoside)，经理化及波谱分析，确定其结构为着刺槐素-(
→2″)-O-α-L-鼠李糖基-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷。
, 百拇医药
Studies on the Chemical Constituents of Muskroot-like Semiaquilegia
(Semiaquilegia adoxoides)Ⅰ. the Structure of Semiaquilinoside
Liu Yanze, Wang Jinqing, Xie Lan, et al.
(Department of Phytochemistry, Henan College of TCM, Zhengzhou 450003)
Abstract Two flavonoid glucosides (Ⅰ and Ⅱ)were isolated from the aerial part of Semiaquilegia adoxoides (DC.) Makino (Ranunculaceae) by repeated column chromatography with silica gel. The structure of Ⅰ, named as semiaquilinoside was established as acacetin(→2″)-O-α-L-rhamnosy1-6-C-β-D-glucopyranoside by spectral methods and X-ray analysis.
, 百拇医药
Key words Semiaquilegia adoxoides (DC.) Makino flavonoid C-glycoside semiaquilinoside
天葵Semiaquilegia adoxoides (DC.) Mak.系采自广西桂林地区的草药，当地名为千年健、老鼠屎，为毛茛科天葵属独种植物。该植物的地上部分和地下块根分别入药，称为天葵及天葵子，均有清热解毒、消肿散结、利尿的作用，用于治疗痈肿瘰疬、淋浊带下、跌打损伤等病〔1〕。广西桂林地区中医王荩卿大夫用天葵全草水煎液，治疗室上性心动过速并发心源性休克、阵发性室性早搏及心肌梗死等严重心脏疾患，疗效显著。我们对其化学成分进行了初步研究。从干燥全草乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分得2种黄酮类化合物Ⅰ及Ⅱ。Ⅰ经化学及波谱分析推测为刺槐素(acacetin)的葡萄糖和鼠李糖组成的双糖碳苷，但结合位置、糖的构型及鼠李糖甲基的特殊性无法解释，后经X-单晶衍射给予了彻底证明，结果为：acacetin-(→2″)-O-α-L-rhamnosyl-6-C-β-D-glucopyranoside，命名为天葵苷(semiaquilinoside,Ⅰ)，并进一步用500 MHz13CHMR及1H-13C Cosy对上述结构进行了证明。
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I为淡黄色针晶，mp 239℃～241℃，〔α〕23D-46°(c,0.136,H2O)，UV光谱(272，328 nm)提示为黄酮类化合物，且具有7-OH和5-OH：1HNMR(90 MHz,DMSO-d6)说明为4′-OCH3〔3.90(3 H，s，C4′-OCH3)，7.27(2 H,d,J＝9.0 Hz,C3′，5′-H)，8.12(2 H，d,J＝9.0 Hz,C2′，6′-H)〕，5-OH(13.71)及7-OH和C6或C8被碳苷的黄酮，另含一包括鼠李糖在内的双糖；EI-MS给出最大分子离子峰428，并有黄酮类化合物常见的Diels-Aldol裂解机制裂分的2个碎片峰m/z 132(见左图
和m/z 165(见右图)。后一碎片表明
连有碳苷糖，为典型黄酮碳苷的裂解模型。与4′-甲氧基牡荆素的裂解碎片完全一致〔2〕；薄层水解法〔3〕检出有鼠李糖的存在。全乙酰化物的EI-MS给出含7个CH3CO的最大碎片离子峰886(M+-CH3CO)及断裂下乙酰鼠李糖的碎片m/z 273和M+-乙酰鼠李糖的碎片m/z 613(M+-乙酰鼠李糖)及一系列脱CH3CO-或CH3COOH的碎片离子。以上这些事实充分说明I为4′-OCH3、5，7-二OH黄酮双糖碳苷这一基本结构，但难以说明苷的位置是6位或8位及鼠李糖和另一葡萄糖是怎样以双糖形式与苷元结合的。为了确定糖的连接位置及构型，我们对其进行了单晶X-衍射测定，肯定了2个糖的结合方式及成苷位置是在C-6位，因此，确定I的结构为acacetin-(1→2″)-O-α-L-rhamnosyl-6-C-β-D-glucopyranoside，见图1所示。13CNMR也证实了上述推测，各碳信号得到完全归属。与Kumamoto H等〔4〕报道的金桔中的2″-O-α-L-rharmnosyl-4′-O-methyl isovitexin的结构一致，但至今未见其数据发表。
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图1 Ⅰ的化学结构
1 仪器和材料
熔点用Reichert型显微熔点仪，温度未校正。比旋度用Perkin-Elmer 241型旋光仪测定。红外光谱用Perkin-Elmer 683型红外光谱仪测定，KBr压片。紫外光谱用Shimadzu UV-240型仪器测定。质谱用VG-ZAB型及JEOL DX-300型仪器测定。核磁共振谱用FX-Q90型和Bruker AM-500型核磁共振仪测定。层析用硅胶均为青岛海洋化工厂产品。天葵于1987年3月采自广西桂林郊区，由河南中医学院刘若庸教授鉴定。
2 提取和分离
取天葵干燥地上部分2.3 kg切碎，依次用10、8、6倍量95%EtOH回流提取3次，每次2 h，合并提取液，减压浓缩至适量体积时加入原料10%的活性炭脱色，滤除活性炭，继续减压浓缩至无醇味得乙醇提取物。将该提取物依次用石油醚(60℃～90℃)、EtOAc和n-BuOH萃取，均至几无色。萃取液分别用无水Na2SO4脱水，然后浓缩至干，得不同萃取物。EtOAc萃取部分(36.5 g)进行低压硅胶洗脱干柱层析，依次用CHCl3-MeOH(8∶2)→(7∶3)→(1∶1)洗脱，TLC检示合并，fr.40～70经重复上述标层析在CHCl3-MeOH(1∶1)洗脱部分fr.41～54得Ⅱ，在fr.55～62得一黄色针晶Ⅰ(230 mg)。
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3 鉴定
天葵苷(semiaquilinoside,Ⅰ)：淡黄色针晶，mp 239℃～241℃(温度计未校正)，HCl-Zn粉反应和Molisch反应均为阳性。UVλMeOHmaxnm：214，272，328；+NaOMe：279，295 sh.375；+NaOAc：279，295 sh，375；+AlCl3：279，295 sh，304，345；+AlCl3/HCl:279,295 sh，304，342，380 sh。IR(KBr)cm-1：3 380(br,OH),1 620,1 510,1 485,1 360,1 245,1 185,1 045,840,810。EI-MS m/z:428,410,392,298(100),297,284,165,132,73,43。1HNMR(90 MHz，DMSO-d6，δ)：13.71(1 H,s,D2O交换消失，C5-OH)，8.14(2 H，d,J＝9.0 Hz，C2′，6′-H)，7.21(2 H，d,J＝9.0 Hz,C3′，5′-H)，6.93(1 H，s,C3-H)，6.63(1 H，s,C8-H)，5.10(1 H,br,rha-H1)，4.73(1 H,d,J＝9.0 Hz，glu-H1)，3.0～4.0(m，糖-H)，3.90(3 H，s,OCH3)，0.58(3 H,br,rha-CH3)。13CNMR(DNSO-d6)δppm：164.1(C2)，104.6(C3)，183.5(C4)，161.5(C4a)，109.6(C5)，165.1(C6)，96.9(C7)，158.3(C8)，105.4(C8a)，124.3(C1′)，129.0(C2′，6′)，115.5(C3′，5′)，164.1(C4′)，73.3(glu-C1″)，71.9(glu-C4″)，81.9(glu-C5″)，62.4(glu-C6″)，101.8(rha-C1)，71.6(rha-C2)，73.3(rha-C3)，71.9(rha-C4)，69.4(rha-C5)，18.0(rha-C6)，55.9(OCH3)。
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接常规方法进行乙酰化得白色乙酰化物，MeOH重结晶得白色颗粒状结晶，EI-MS给出最大离子886(M-42)，其余离子分别为827(M-42-CH3COO)，767(M-42-2×CH3COO+H)，655(M-273)，613(655-42)，553(613-CH3COO)，494(553-CH3COO)，435(494-CH3COO)。421，313，273，259，213，157，153，139，111，97。
Ⅰ单晶X-衍射分析结果如下：Ⅰ为淡黄色针晶，属单斜晶系，空间群为A2，晶胞参数a＝10.672(2)，b＝6.678(2)，c＝39.701(8)；β＝88.35°(2)，V＝2 829.2(15)3，Z＝4，用NICOLET R3m/E四圆衍射仪收集衍射数据，CuKα辐射，石墨单色器单色，获独立衍射1 980个，其中可观察点(Ⅰ≥3σ(Ⅰ))1 672个。用SHELXTL程序系统解析结构，块矩阵最小二乘方法精化结构参数，差值电子密度法获得了全部氢原子的坐标。最终的偏离因子R＝0.0609。
, 百拇医药
*Address:Liu Yanze Department of Phytochemitry,Henan College of Traditional Chinese Medicine,Zhengxhou
**通讯联系人。
参考文献
[1] 江苏新医学院编.中药大辞典.上海：上海人民出版社，1997：313
[2] 中国科学院上海药物研究所编译.黄酮体化合物鉴定手册.北京：科学出版社，1981：710
[3] 赵萍萍，等.药学学报，1987，22(1)：70
[4] Kumamoto H, et al.Agric Biol Chem,1985，49(9):2631
(1998-03-16收稿), 百拇医药(刘延泽 王荩卿 谢 兰 贺存恒 谢晶曦**)
单位：刘延泽 河南中医学院植化教研室(郑州450003)；王荩卿 广西壮族自治区桂林地区教师进修学院；谢 兰 贺存恒 谢晶曦**中国医学科学院药物研究所，中国协和医科大学
关键词：天葵;黄酮碳苷;天葵苷
天葵化学成分的研究 摘 要 从毛茛科植物天葵Semiaquilegia adoxoides(DC.) Mak.干燥全草中分得一种黄酮双糖苷称天葵苷(semiaquilinoside)，经理化及波谱分析，确定其结构为着刺槐素-(
→2″)-O-α-L-鼠李糖基-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷。, 百拇医药
Studies on the Chemical Constituents of Muskroot-like Semiaquilegia
(Semiaquilegia adoxoides)Ⅰ. the Structure of Semiaquilinoside
Liu Yanze, Wang Jinqing, Xie Lan, et al.
(Department of Phytochemistry, Henan College of TCM, Zhengzhou 450003)
Abstract Two flavonoid glucosides (Ⅰ and Ⅱ)were isolated from the aerial part of Semiaquilegia adoxoides (DC.) Makino (Ranunculaceae) by repeated column chromatography with silica gel. The structure of Ⅰ, named as semiaquilinoside was established as acacetin(
→2″)-O-α-L-rhamnosy1-6-C-β-D-glucopyranoside by spectral methods and X-ray analysis., 百拇医药
Key words Semiaquilegia adoxoides (DC.) Makino flavonoid C-glycoside semiaquilinoside
天葵Semiaquilegia adoxoides (DC.) Mak.系采自广西桂林地区的草药，当地名为千年健、老鼠屎，为毛茛科天葵属独种植物。该植物的地上部分和地下块根分别入药，称为天葵及天葵子，均有清热解毒、消肿散结、利尿的作用，用于治疗痈肿瘰疬、淋浊带下、跌打损伤等病〔1〕。广西桂林地区中医王荩卿大夫用天葵全草水煎液，治疗室上性心动过速并发心源性休克、阵发性室性早搏及心肌梗死等严重心脏疾患，疗效显著。我们对其化学成分进行了初步研究。从干燥全草乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分得2种黄酮类化合物Ⅰ及Ⅱ。Ⅰ经化学及波谱分析推测为刺槐素(acacetin)的葡萄糖和鼠李糖组成的双糖碳苷，但结合位置、糖的构型及鼠李糖甲基的特殊性无法解释，后经X-单晶衍射给予了彻底证明，结果为：acacetin-(
→2″)-O-α-L-rhamnosyl-6-C-β-D-glucopyranoside，命名为天葵苷(semiaquilinoside,Ⅰ)，并进一步用500 MHz13CHMR及1H-13C Cosy对上述结构进行了证明。, http://www.100md.com
I为淡黄色针晶，mp 239℃～241℃，〔α〕23D-46°(c,0.136,H2O)，UV光谱(272，328 nm)提示为黄酮类化合物，且具有7-OH和5-OH：1HNMR(90 MHz,DMSO-d6)说明为4′-OCH3〔3.90(3 H，s，C4′-OCH3)，7.27(2 H,d,J＝9.0 Hz,C3′，5′-H)，8.12(2 H，d,J＝9.0 Hz,C2′，6′-H)〕，5-OH(13.71)及7-OH和C6或C8被碳苷的黄酮，另含一包括鼠李糖在内的双糖；EI-MS给出最大分子离子峰428，并有黄酮类化合物常见的Diels-Aldol裂解机制裂分的2个碎片峰m/z 132(见左图
和m/z 165(见右图)。后一碎片表明连有碳苷糖，为典型黄酮碳苷的裂解模型。与4′-甲氧基牡荆素的裂解碎片完全一致〔2〕；薄层水解法〔3〕检出有鼠李糖的存在。全乙酰化物的EI-MS给出含7个CH3CO的最大碎片离子峰886(M+-CH3CO)及断裂下乙酰鼠李糖的碎片m/z 273和M+-乙酰鼠李糖的碎片m/z 613(M+-乙酰鼠李糖)及一系列脱CH3CO-或CH3COOH的碎片离子。以上这些事实充分说明I为4′-OCH3、5，7-二OH黄酮双糖碳苷这一基本结构，但难以说明苷的位置是6位或8位及鼠李糖和另一葡萄糖是怎样以双糖形式与苷元结合的。为了确定糖的连接位置及构型，我们对其进行了单晶X-衍射测定，肯定了2个糖的结合方式及成苷位置是在C-6位，因此，确定I的结构为acacetin-(1→2″)-O-α-L-rhamnosyl-6-C-β-D-glucopyranoside，见图1所示。13CNMR也证实了上述推测，各碳信号得到完全归属。与Kumamoto H等〔4〕报道的金桔中的2″-O-α-L-rharmnosyl-4′-O-methyl isovitexin的结构一致，但至今未见其数据发表。, 百拇医药
图1 Ⅰ的化学结构
1 仪器和材料
熔点用Reichert型显微熔点仪，温度未校正。比旋度用Perkin-Elmer 241型旋光仪测定。红外光谱用Perkin-Elmer 683型红外光谱仪测定，KBr压片。紫外光谱用Shimadzu UV-240型仪器测定。质谱用VG-ZAB型及JEOL DX-300型仪器测定。核磁共振谱用FX-Q90型和Bruker AM-500型核磁共振仪测定。层析用硅胶均为青岛海洋化工厂产品。天葵于1987年3月采自广西桂林郊区，由河南中医学院刘若庸教授鉴定。
2 提取和分离
取天葵干燥地上部分2.3 kg切碎，依次用10、8、6倍量95%EtOH回流提取3次，每次2 h，合并提取液，减压浓缩至适量体积时加入原料10%的活性炭脱色，滤除活性炭，继续减压浓缩至无醇味得乙醇提取物。将该提取物依次用石油醚(60℃～90℃)、EtOAc和n-BuOH萃取，均至几无色。萃取液分别用无水Na2SO4脱水，然后浓缩至干，得不同萃取物。EtOAc萃取部分(36.5 g)进行低压硅胶洗脱干柱层析，依次用CHCl3-MeOH(8∶2)→(7∶3)→(1∶1)洗脱，TLC检示合并，fr.40～70经重复上述标层析在CHCl3-MeOH(1∶1)洗脱部分fr.41～54得Ⅱ，在fr.55～62得一黄色针晶Ⅰ(230 mg)。
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3 鉴定
天葵苷(semiaquilinoside,Ⅰ)：淡黄色针晶，mp 239℃～241℃(温度计未校正)，HCl-Zn粉反应和Molisch反应均为阳性。UVλMeOHmaxnm：214，272，328；+NaOMe：279，295 sh.375；+NaOAc：279，295 sh，375；+AlCl3：279，295 sh，304，345；+AlCl3/HCl:279,295 sh，304，342，380 sh。IR(KBr)cm-1：3 380(br,OH),1 620,1 510,1 485,1 360,1 245,1 185,1 045,840,810。EI-MS m/z:428,410,392,298(100),297,284,165,132,73,43。1HNMR(90 MHz，DMSO-d6，δ)：13.71(1 H,s,D2O交换消失，C5-OH)，8.14(2 H，d,J＝9.0 Hz，C2′，6′-H)，7.21(2 H，d,J＝9.0 Hz,C3′，5′-H)，6.93(1 H，s,C3-H)，6.63(1 H，s,C8-H)，5.10(1 H,br,rha-H1)，4.73(1 H,d,J＝9.0 Hz，glu-H1)，3.0～4.0(m，糖-H)，3.90(3 H，s,OCH3)，0.58(3 H,br,rha-CH3)。13CNMR(DNSO-d6)δppm：164.1(C2)，104.6(C3)，183.5(C4)，161.5(C4a)，109.6(C5)，165.1(C6)，96.9(C7)，158.3(C8)，105.4(C8a)，124.3(C1′)，129.0(C2′，6′)，115.5(C3′，5′)，164.1(C4′)，73.3(glu-C1″)，71.9(glu-C4″)，81.9(glu-C5″)，62.4(glu-C6″)，101.8(rha-C1)，71.6(rha-C2)，73.3(rha-C3)，71.9(rha-C4)，69.4(rha-C5)，18.0(rha-C6)，55.9(OCH3)。
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接常规方法进行乙酰化得白色乙酰化物，MeOH重结晶得白色颗粒状结晶，EI-MS给出最大离子886(M-42)，其余离子分别为827(M-42-CH3COO)，767(M-42-2×CH3COO+H)，655(M-273)，613(655-42)，553(613-CH3COO)，494(553-CH3COO)，435(494-CH3COO)。421，313，273，259，213，157，153，139，111，97。
Ⅰ单晶X-衍射分析结果如下：Ⅰ为淡黄色针晶，属单斜晶系，空间群为A2，晶胞参数a＝10.672(2)，b＝6.678(2)，c＝39.701(8)；β＝88.35°(2)，V＝2 829.2(15)3，Z＝4，用NICOLET R3m/E四圆衍射仪收集衍射数据，CuKα辐射，石墨单色器单色，获独立衍射1 980个，其中可观察点(Ⅰ≥3σ(Ⅰ))1 672个。用SHELXTL程序系统解析结构，块矩阵最小二乘方法精化结构参数，差值电子密度法获得了全部氢原子的坐标。最终的偏离因子R＝0.0609。
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*Address:Liu Yanze Department of Phytochemitry,Henan College of Traditional Chinese Medicine,Zhengxhou
**通讯联系人。
参考文献
[1] 江苏新医学院编.中药大辞典.上海：上海人民出版社，1997：313
[2] 中国科学院上海药物研究所编译.黄酮体化合物鉴定手册.北京：科学出版社，1981：710
[3] 赵萍萍，等.药学学报，1987，22(1)：70
[4] Kumamoto H, et al.Agric Biol Chem,1985，49(9):2631
(1998-03-16收稿), 百拇医药(刘延泽 王荩卿 谢 兰 贺存恒 谢晶曦**)