三蛇胆川贝糖浆中麻黄碱的鉴别与含量测定
作者：甘勇强*
单位：广西药品检验所 南宁 530021
关键词：三蛇胆川贝糖浆；麻黄碱；鉴别；含量测定
中草药990716 摘 要 用TLC法和HPLC法对三蛇胆川贝糖浆中麻黄碱进行定性鉴别和含量测定。含量测定采用 μBondapakC18柱(4.6mm×300 mm 10μ)，以乙腈-水-磷酸-十二烷基硫酸钠(38∶62∶0.1∶0.5)为流动相，检测波长207nm，回收率为96.9%，RSD为1.38%。
三蛇胆川贝糖浆是《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第三册(1991年)收载的品种，由三蛇胆、川贝、麻黄等组成，具有清热润肺，化痰、止咳之功，为常用的中成药。部颁标准中有生物碱试管反应鉴别，无专属性强的薄层色谱鉴别和含量测定项目。为更好地控制药品质量，保证用药安全、有效，对方中的麻黄所含有效成分麻黄碱进行TLC鉴别和HPLC含量测定。
, 百拇医药
1 仪器、样品及试剂
Waters 输液泵 Model 510、490检测器及750数据处理机；盐酸麻黄碱对照品由中国药品生物制品检定所提供；三蛇胆川贝糖浆由广西A、B药厂提供，批号分别为9703040、9703041、970621、970623；硅胶G(青岛海洋化工厂)，乙腈为优级纯，乙醚、氯仿、甲醇、磷酸、十二烷基硫酸钠等为分析纯。
2 TLC鉴别
2.1 TLC溶液制备：取三蛇胆川贝糖浆50 mL，加浓氨溶液5 mL，用乙醚振摇提取2次，每次25 mL，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作供试品溶液。另取麻黄对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。再取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成1 mg/mL的溶液，作为对照品溶液。
2.2 TLC条件：硅胶G-CMC薄层板；展开剂：氯仿-甲醇-浓氨溶液(20∶5∶0.5)；点样量：供试液5～10 μL，对照液5 μL；显色：茚三酮试液、105℃烘约5 min。结果麻黄碱、样品、对照品斑点一致，空白无麻黄碱斑点。
, 百拇医药
3 HPLC含量测定
3.1 HPLC条件：色谱柱：μBondapak C18(4.6 mm×300 mm 10 μ)流动相：乙腈-水-磷酸-十二烷基硫酸钠(38∶62∶0.1∶0.5)；检测波长：207 nm[陈发奎.中草药，1994，25(11)：571]；理论塔板数按麻黄碱计为3 500，样品中麻黄碱分离很好。
3.2 线性关系的考察：精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液(11.6 mg→10 mL)0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL,分别置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，分别精密量取10 μL，注入液相色谱仪，以盐酸麻黄碱进样量为横坐标，峰面积为纵标，绘制标准曲线。回归方程为：Y=47522.1X-3860.0,r=0.9995。结果表明，盐酸麻黄碱在0.58～2.90μg范围内呈线性关系。
3.3 精密度与重复性试验：精密吸取对照品溶液5μL，重复进样5次，测得平均峰面积积分值为20 571，RSD为0.65%(n=5)；对同一批样品(批号9703041)进行5次测定，求得RSD为1.41%。
, http://www.100md.com
3.4 加样回收率试验：精密吸取已知含量的样品(批号9703041)10mL，分别精密加入盐酸麻黄碱对照品溶液(0.116 mg/mL)4 mL，按样品测定方法测定，4次测定结果平均回收率为96.9%，RSD为1.38%。
3.5 样品测定与结果：精密吸取三蛇胆川贝糖浆25mL，加浓氨溶液5mL，用乙醚振摇提取4次(30、20、20、10mL)，合并乙醚提取液，用氯化钠饱和的水溶液洗涤3次，每次10 mL， 弃去水洗涤液，乙醚提取液蒸干，残渣加流动相溶解，转移至5 mL量瓶中，定容，摇匀，微孔滤膜滤过，精密吸取滤液与对照品溶液各10μL，进样测定，以外标法计算。样品测定结果见表1。
表1 样品含麻黄碱的测定结果 生产单位
批号
含量%(mg/mL)
, 百拇医药 广西A制药厂
9703040
1.445
广西A制药厂
9703041
1.514
广西B制药厂
970621
0.388
广西B制药厂
970623
0.375
4 讨论
4.1 通过TLC法能有效地定性鉴别三蛇胆川贝糖浆中麻黄，空白无干扰，专属性强，重现性好，克服部颁标准中生物碱试管反应专属性差的缺点。
4.2 不同厂家生产的三蛇胆川贝糖浆，所含麻黄碱的量有差别，测得值相差几倍。
4.3 《中国药典》1995年版一部规定，麻黄药材中含麻黄碱不得少于0.8%，按比值理论推算，三蛇胆川贝糖浆中含麻黄碱的量至少为0.6%(mg/mL),实际测得值与之相差较大，表明中成药标准中应建立含量测定项，以提高药品的质量控制指标，同时需加强对中成药的生产监督管理。
收稿日期：1998-10-30, 百拇医药(甘勇强*)
单位：广西药品检验所 南宁 530021
关键词：三蛇胆川贝糖浆；麻黄碱；鉴别；含量测定
中草药990716 摘 要 用TLC法和HPLC法对三蛇胆川贝糖浆中麻黄碱进行定性鉴别和含量测定。含量测定采用 μBondapakC18柱(4.6mm×300 mm 10μ)，以乙腈-水-磷酸-十二烷基硫酸钠(38∶62∶0.1∶0.5)为流动相，检测波长207nm，回收率为96.9%，RSD为1.38%。
三蛇胆川贝糖浆是《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第三册(1991年)收载的品种，由三蛇胆、川贝、麻黄等组成，具有清热润肺，化痰、止咳之功，为常用的中成药。部颁标准中有生物碱试管反应鉴别，无专属性强的薄层色谱鉴别和含量测定项目。为更好地控制药品质量，保证用药安全、有效，对方中的麻黄所含有效成分麻黄碱进行TLC鉴别和HPLC含量测定。
, 百拇医药
1 仪器、样品及试剂
Waters 输液泵 Model 510、490检测器及750数据处理机；盐酸麻黄碱对照品由中国药品生物制品检定所提供；三蛇胆川贝糖浆由广西A、B药厂提供，批号分别为9703040、9703041、970621、970623；硅胶G(青岛海洋化工厂)，乙腈为优级纯，乙醚、氯仿、甲醇、磷酸、十二烷基硫酸钠等为分析纯。
2 TLC鉴别
2.1 TLC溶液制备：取三蛇胆川贝糖浆50 mL，加浓氨溶液5 mL，用乙醚振摇提取2次，每次25 mL，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作供试品溶液。另取麻黄对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。再取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成1 mg/mL的溶液，作为对照品溶液。
2.2 TLC条件：硅胶G-CMC薄层板；展开剂：氯仿-甲醇-浓氨溶液(20∶5∶0.5)；点样量：供试液5～10 μL，对照液5 μL；显色：茚三酮试液、105℃烘约5 min。结果麻黄碱、样品、对照品斑点一致，空白无麻黄碱斑点。
, 百拇医药
3 HPLC含量测定
3.1 HPLC条件：色谱柱：μBondapak C18(4.6 mm×300 mm 10 μ)流动相：乙腈-水-磷酸-十二烷基硫酸钠(38∶62∶0.1∶0.5)；检测波长：207 nm[陈发奎.中草药，1994，25(11)：571]；理论塔板数按麻黄碱计为3 500，样品中麻黄碱分离很好。
3.2 线性关系的考察：精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液(11.6 mg→10 mL)0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL,分别置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，分别精密量取10 μL，注入液相色谱仪，以盐酸麻黄碱进样量为横坐标，峰面积为纵标，绘制标准曲线。回归方程为：Y=47522.1X-3860.0,r=0.9995。结果表明，盐酸麻黄碱在0.58～2.90μg范围内呈线性关系。
3.3 精密度与重复性试验：精密吸取对照品溶液5μL，重复进样5次，测得平均峰面积积分值为20 571，RSD为0.65%(n=5)；对同一批样品(批号9703041)进行5次测定，求得RSD为1.41%。
, http://www.100md.com
3.4 加样回收率试验：精密吸取已知含量的样品(批号9703041)10mL，分别精密加入盐酸麻黄碱对照品溶液(0.116 mg/mL)4 mL，按样品测定方法测定，4次测定结果平均回收率为96.9%，RSD为1.38%。
3.5 样品测定与结果：精密吸取三蛇胆川贝糖浆25mL，加浓氨溶液5mL，用乙醚振摇提取4次(30、20、20、10mL)，合并乙醚提取液，用氯化钠饱和的水溶液洗涤3次，每次10 mL， 弃去水洗涤液，乙醚提取液蒸干，残渣加流动相溶解，转移至5 mL量瓶中，定容，摇匀，微孔滤膜滤过，精密吸取滤液与对照品溶液各10μL，进样测定，以外标法计算。样品测定结果见表1。
表1 样品含麻黄碱的测定结果 生产单位
批号
含量%(mg/mL)
, 百拇医药 广西A制药厂
9703040
1.445
广西A制药厂
9703041
1.514
广西B制药厂
970621
0.388
广西B制药厂
970623
0.375
4 讨论
4.1 通过TLC法能有效地定性鉴别三蛇胆川贝糖浆中麻黄，空白无干扰，专属性强，重现性好，克服部颁标准中生物碱试管反应专属性差的缺点。
4.2 不同厂家生产的三蛇胆川贝糖浆，所含麻黄碱的量有差别，测得值相差几倍。
4.3 《中国药典》1995年版一部规定，麻黄药材中含麻黄碱不得少于0.8%，按比值理论推算，三蛇胆川贝糖浆中含麻黄碱的量至少为0.6%(mg/mL),实际测得值与之相差较大，表明中成药标准中应建立含量测定项，以提高药品的质量控制指标，同时需加强对中成药的生产监督管理。
收稿日期：1998-10-30, 百拇医药(甘勇强*)