HPLC法测定荡涤灵(冲剂)中盐酸小檗碱含量
作者：吕琳 朱宇明 司云珊 周继胡 张谨
单位：朱宇明 吕琳 司云珊 周继胡(吉林省中医中药研究院 长春 130021)；张谨(吉林省人民医院)
关键词：
中草药000116 荡涤灵(冲剂)是由黄连、地黄等13味中药组成的复方制剂，为控制产品质量，对君药黄连中主要有效成分之一盐酸小檗碱进行了含量测定。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪：美国Waters 600泵，486紫外检测器，7725手动进样器。
盐酸小檗碱(中国药品生物制品检定所)，乙腈、磷酸分析纯，水去离子水。
荡涤灵为长春中药制药有限责任公司产品。
, http://www.100md.com
2 方法与结果
2.1 色谱条件：Waters C18径向加压柱(8 mm×10 cm,5 μm)；流动相为乙腈-0.02 mol/L磷酸(40∶60)，流速为1 mL/min；检测波长为346 nm。
2.2 对照品溶液的制备：配制0.04 mg/mL的甲醇溶液。
2.3 供试品溶液的制备：取本品5 g，研碎，精密称定，置50 mL量瓶中，加入盐酸-甲醇(1∶100)至近刻度，60 ℃水浴上加热15 min，超声处理30 min，室温放置过夜，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液5 mL，上Al2O3净化柱(10 g Al2O3，95 %甲醇湿法装柱，φ1.5 cm)，用30 mL 95%甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣加甲醇溶解，并定量转移至2 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
, 百拇医药
2.4 线性关系考察：精密吸取上述对照品溶液2.5，5.0，7.5，10.0，12.5，15.0，17.5 μL,注入液相色谱仪测定，回归方程Y=1 041 254.464X-1 171.07，r=0.999 1。结果表明盐酸小檗碱在0.1～0.7 μg范围内，浓度与峰面积值呈良好的线性关系。
2.5 稳定性试验：取同一供试品溶液，每隔一定时间重复测定一次，共测72 h，RSD为0.92 %。
2.6 精密度试验：取同一供试品溶液，连续进样，RSD为0.61%(n=5)。
2.7 重现性试验：取同一样品独立测定5次，RSD为3.18%。
2.8 回收率试验：于已知含量的样品中，准确加入盐酸小檗碱对照品适量，依法测定，结果回收率为98.72 %，RSD=2.73 %(n=5)。
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2.9 样品测定：分别精密吸取对照品溶液5，10 μL，供试品溶液10 μL，注入液相色谱仪，采用外标法计算，结果见表1。
表1 样品含量测定结果 编号
含量(mg/g)
平均含量(mg/g)
1
0.116 0.118
0.117
2
0.121 0.128
0.124
3
, 百拇医药
0.115 0.113
0.114
3 讨论
3.1 曾对样品提取方法进行了考察，结果表明盐酸-甲醇(1∶100)较甲醇的提取率为高，而超声提取较索氏提取的提取率为高。
3.2 对Al2O3净化柱洗脱剂用量进行考察，结果表明洗脱剂用量为30 mL时，盐酸小檗碱已被完全洗脱下来。
3.3 试验比较了流动相：乙腈-0.02 mol/L磷酸(60∶40)、32 %乙腈、0.02 mol/L磷酸、乙腈-0.02 mol/L磷酸(40∶60)，结果以后者为佳。■
吕琳：女，医学学士学位，助研，主要从事中草药化学成分研究及新药开发研究，发表学术论文40余篇，获科研成果10项，目前正参与研究国家“九.五”攻关项目、“九.五”国家攀登计划预选项目(中药现代化关键问题的基础研究)。
(1999-04-23 收稿), 百拇医药
单位：朱宇明 吕琳 司云珊 周继胡(吉林省中医中药研究院 长春 130021)；张谨(吉林省人民医院)
关键词：
中草药000116 荡涤灵(冲剂)是由黄连、地黄等13味中药组成的复方制剂，为控制产品质量，对君药黄连中主要有效成分之一盐酸小檗碱进行了含量测定。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪：美国Waters 600泵，486紫外检测器，7725手动进样器。
盐酸小檗碱(中国药品生物制品检定所)，乙腈、磷酸分析纯，水去离子水。
荡涤灵为长春中药制药有限责任公司产品。
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2 方法与结果
2.1 色谱条件：Waters C18径向加压柱(8 mm×10 cm,5 μm)；流动相为乙腈-0.02 mol/L磷酸(40∶60)，流速为1 mL/min；检测波长为346 nm。
2.2 对照品溶液的制备：配制0.04 mg/mL的甲醇溶液。
2.3 供试品溶液的制备：取本品5 g，研碎，精密称定，置50 mL量瓶中，加入盐酸-甲醇(1∶100)至近刻度，60 ℃水浴上加热15 min，超声处理30 min，室温放置过夜，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液5 mL，上Al2O3净化柱(10 g Al2O3，95 %甲醇湿法装柱，φ1.5 cm)，用30 mL 95%甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣加甲醇溶解，并定量转移至2 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
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2.4 线性关系考察：精密吸取上述对照品溶液2.5，5.0，7.5，10.0，12.5，15.0，17.5 μL,注入液相色谱仪测定，回归方程Y=1 041 254.464X-1 171.07，r=0.999 1。结果表明盐酸小檗碱在0.1～0.7 μg范围内，浓度与峰面积值呈良好的线性关系。
2.5 稳定性试验：取同一供试品溶液，每隔一定时间重复测定一次，共测72 h，RSD为0.92 %。
2.6 精密度试验：取同一供试品溶液，连续进样，RSD为0.61%(n=5)。
2.7 重现性试验：取同一样品独立测定5次，RSD为3.18%。
2.8 回收率试验：于已知含量的样品中，准确加入盐酸小檗碱对照品适量，依法测定，结果回收率为98.72 %，RSD=2.73 %(n=5)。
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2.9 样品测定：分别精密吸取对照品溶液5，10 μL，供试品溶液10 μL，注入液相色谱仪，采用外标法计算，结果见表1。
表1 样品含量测定结果 编号
含量(mg/g)
平均含量(mg/g)
1
0.116 0.118
0.117
2
0.121 0.128
0.124
3
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0.115 0.113
0.114
3 讨论
3.1 曾对样品提取方法进行了考察，结果表明盐酸-甲醇(1∶100)较甲醇的提取率为高，而超声提取较索氏提取的提取率为高。
3.2 对Al2O3净化柱洗脱剂用量进行考察，结果表明洗脱剂用量为30 mL时，盐酸小檗碱已被完全洗脱下来。
3.3 试验比较了流动相：乙腈-0.02 mol/L磷酸(60∶40)、32 %乙腈、0.02 mol/L磷酸、乙腈-0.02 mol/L磷酸(40∶60)，结果以后者为佳。■
吕琳：女，医学学士学位，助研，主要从事中草药化学成分研究及新药开发研究，发表学术论文40余篇，获科研成果10项，目前正参与研究国家“九.五”攻关项目、“九.五”国家攀登计划预选项目(中药现代化关键问题的基础研究)。
(1999-04-23 收稿), 百拇医药