高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍片的含量
 |
| 第1页 |
参见附件(1882KB，2页)。
【摘要】目的：建立了高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍片中盐酸二甲双胍含量的方法。 方法:主要参数为： 色谱柱为KromasilC18(250mmX4.6mm，5μm)，流动相为甲醇—离子对试液(庚烷磺酸钠0.5056g，加三乙胺1.4ml,加水至1000ml, 用磷酸调节PH值至3.5士0.05)，检测波长为235nm，流速为1ml﹒min-1。该方法对盐酸二甲双胍的平均回收率为99.96%，RSD为0.41%(n=5)。结果：本法与标准法比较，没有显著性差别。本实验建立了简单、准确、灵敏的测定盐酸二甲双胍浓度的HPLC方法，可用于含量的测定。
【关键词】HPLC法；盐酸二甲双胍片；盐酸二甲双胍
糖尿病是由遗传和环境相互作用而引起的常见病，临床以高血糖为主要标志，常见症状有多饮、多尿、多食以及消廋等，可引起身体多系统的损害。引起胰岛素绝对或相对分泌不足以及靶组织细胞对胰岛素敏感性降低，引起蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合症；分为I型糖尿病和II型糖尿病。盐酸二甲双胍首选用于单纯饮食控制及体育锻炼治疗无效的II型糖尿病，特别是肥胖的II型糖尿病。对于I型和II型糖尿病，本品与胰岛素合用，可增加胰岛素的降血糖作用，减少胰岛素用量，防止低血糖发生；本品也可与磺脲类口服降糖药合用，具协同作用。国家药品标准采用紫外-可见分光光度法测定含量，本文采用HPLC法，对盐酸二甲双胍片进行含量测定。实验结果标明，本法简便、快速、专属性强，操作简便，结果准确。
1仪器与试药
LC-1200型高效液相色谱仪(安捷伦公司生产)，VWD型紫外检测器，Agilent化学工作站；普利赛斯92s-202A电子分析天平；AS5150A型超声波振荡器。
盐酸二甲双胍对照品(批号：100664-200401，中国药品生物制品检定所)，盐酸二甲双胍片(上海信谊药厂有限公司 批号：100723；深圳市中联制药有限公司 批号：090901与批号：100904)，甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，庚烷磺酸钠为色谱专用试剂，三乙胺、磷酸为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：KromasilC18(250mmX4.6mm，5μm)；色谱柱为KromasilC18(250mmX4.6mm，5μm)，流动相为甲醇—离子对试液(庚烷磺酸钠0.5056g，加三乙胺1.4ml,加水至1000ml, 用磷酸调节PH值至3.5士0.05)，检测波长为235nm，流速为1ml﹒min-1。；柱温：30℃；室温25℃;进样量：10ul.在此条件下，盐酸二甲双胍保留时间为：3.7min。
2.2 供试品的制备
精密称取本品适量(约相当盐酸二甲双胍0.5g)，置于100ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液10ml于100ml容量瓶中，取10μl进样测定，记录色谱图
2.3对照品的制备
精密称取盐酸二甲双胍对照品0.0506g，置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取10μl进样测定，记录色谱图
3.1线性关系
精密称取盐酸二甲双胍对照品0.0506g，置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。用甲醇稀释制备浓度分别为101.2ug/ml，151.8ug/ml, 253ug/ml, 506ug/ml, 759ug/ml, 1012ug/ml、1265ug/ml系列标准溶液按上述色谱条件，取10μl进样，记录色谱图，以峰面积Y对对照品进样量(μg﹒ml-1)作线性回归。结果回归方程(n=7)为：
Y=1990.8X+385.05г=0.9999
线性范围为：101.2μg/ml-1265μg/ml
3.2重复性实验
取同一批号(100723)样品适量(约相当于盐酸二甲双胍0.5mg)3份，精密量取，按样品测定项下的方法，测定盐酸二甲双胍的含量为99.6%、100.2%、99.7%；RSD为0.32%。
3.3稳定性实验
取重复性实验“3.2”中的第一份溶液，室温下在0、1、2、3、4小时测定，结果表明，本品的供试品溶液在室温4小时内基本稳定，计算得RSD=0.34%，n=5。
3.4精密度试验
取线性关系考察中盐酸二甲双胍浓度为0.5mg/ml的对照品溶液，重复进样5次，结果RSD为0.26%。
3.5加样回收实验
精密称取已知含量的样品(批号100723)适量(约相当于盐酸二甲双胍0. 5g)5份，分别置于100ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取10ml于100ml容量瓶中，分别精密加入盐酸二甲双胍对照品储备液0.506mg，加甲醇稀释至刻度，摇匀，照样品测定项下的方法测定，结果见表1。
表1 回收率测定结果表(n=5)
3.6样品含量的测定
精密称取本品适量(约相当盐酸二甲双胍0.5g)，按“2.2”项下方法制备供试品溶液；另取105?C干燥至恒重的盐酸二甲双胍对照品0.0506g,用甲醇稀释至浓度为0.5mg/ml的溶液作为对照品溶液，按上述色谱条件，各取10μl进样测定，记录色谱图；按外标法以峰面积计算，测得结果与国家药品标准[1]方法比较 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(1882KB，2页)。